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羊棘球蚴（包蟲）EG95蛋白ELISA抗體檢測試劑盒

用于檢測綿羊、山羊血清中細(xì)粒棘球蚴(包蟲)主要保護(hù)性抗原EG95蛋白的抗體。

分類：

試劑盒類

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詳細(xì)信息

　　【獸藥名稱】

　　通用名：羊棘球蚴(包蟲)EG95蛋白ELISA抗體檢測試劑盒

　　商品名：無

　　英文名：ELISA Kit for Detection of Goat and Sheep Antibody against EG95 Protein of Echinococcus (Hydatid)

　　漢語拼音：Yang Jiqiuyou (Baochong) EG95 Danbai ELISA Kangti Jiance Shijihe

　　【主要成分與含量】

(1)	抗原包被板	96孔/板x2板/盒
(2)	陰性對(duì)照血清	50uL/管x1管/盒
(3)	陽性對(duì)照血清	50uL/管x1管/盒
(4)	酶標(biāo)二抗	0.2mL/管x2管/盒
(5)	稀釋液	30mL/瓶x2瓶/盒
(6)	10x濃縮洗滌液	30mL/瓶x1瓶/盒
(7)	TMB底物A液	10mL/瓶x1瓶/盒
(8)	TMB底物B液	10mL/瓶x1瓶/盒
(9)	終止液	10mL/瓶x1瓶/盒
(10)	血清稀釋板	96孔/板x2板/盒
(11)	封板膜	2張/盒
(12)	說明書	1份/盒

　　【性狀】

　　試劑盒應(yīng)密封完好、無破損、無裂痕、無滲漏。抗原包被板、陽性對(duì)照血清、陰性對(duì)照血清、酶標(biāo)二抗、稀釋液、10x濃縮洗滌液、TMB底物A液、TMB底物B液、終止液等組分齊全。

　　【作用與用途】

　　用于檢測綿羊、山羊血清中細(xì)粒棘球蚴(包蟲)主要保護(hù)性抗原EG95蛋白的抗體。

　　【用法與判定】

　　1 用法

　　1.1 樣品制備取動(dòng)物全血，待血液凝固后，4000r/min離心10分鐘，收集上清備用；也可采集血液，待凝固后自然析出血清，吸出血清備用。要求血清清亮，無溶血。

　　1.2 洗滌液配制 10x濃縮洗滌液恢復(fù)至室溫后充分搖勻，用去離子水作10倍稀釋備用。

　　1.3 樣品與對(duì)照品稀釋在血清稀釋板上，將待檢血清和陰、陽性對(duì)照血清按1：50倍的體積稀釋(推薦稀釋方法：98uL樣品稀釋液中加2uL血清樣品)。

　　1.4 操作步驟

　　1.4.1 加樣取抗原包被板，每孔加入50u稀釋液，再取稀釋好的待檢血清和對(duì)照血清各50uL加入相應(yīng)孔中，其中，陰性、陽性對(duì)照血清各2孔，輕輕振搖混勻孔中樣品(勿溢出)。

　　1.4.2 溫育置37°C溫箱內(nèi)30分鐘。

　　1.4.3 洗滌棄去反應(yīng)液，每孔加入稀釋好的洗滌液200uL，室溫靜置浸泡1分鐘，用掉洗滌液，在吸水紙上拍干，重復(fù)3次：或者自動(dòng)洗板機(jī)洗滌3次。

　　1.4.4 加酶標(biāo)二抗用稀釋液將酶標(biāo)二抗進(jìn)行1：100稀釋(現(xiàn)配現(xiàn)用)，每孔加入稀釋好的酶標(biāo)二抗100uL。

　　1.4.5 溫育置37°C溫箱內(nèi)30分鐘。

　　1.4.6 洗滌同1.4.3。

　　1.4.7 顯色每孔加入100uL底物工作液(TMB底物A液與B液等體積混合好，現(xiàn)配現(xiàn)用)，室溫避光顯色反應(yīng)10分鐘。

　　1.4.8 終止每孔加終止液50uL，10分鐘內(nèi)測定結(jié)果

　　1.4.9 讀數(shù) 在酶標(biāo)儀內(nèi)讀取各孔450nm波長吸光度。

　　2 判定

　　2.1 試驗(yàn)成立條件陽性對(duì)照孔OD：值均>1.20，陰性對(duì)照孔ODsom值均<0. 20。

　　2.2 結(jié)果判定待檢血清孔OD值<0.30，判為棘球蚴(包蟲)EG95抗體陰性；待檢血清孔OD：som值≥0.30，判為棘球蚴(包蟲)EG95抗體陽性。

　　【注意事項(xiàng)】

　　(1)除酶標(biāo)二抗外，各種試劑都應(yīng)于使用前平衡至室溫后方可使用，有結(jié)晶析出的，務(wù)必37℃水浴加熱使其完全溶解；液體試劑用前混勻。為保證結(jié)果準(zhǔn)確可靠，操作環(huán)境溫度應(yīng)控制在20土5℃。

　　(2)微量移液器應(yīng)進(jìn)行定期校準(zhǔn)，以避免誤差過大影響檢測結(jié)果。

　　(3)應(yīng)確保血清樣本的質(zhì)量，避免使用嚴(yán)重溶血樣品和脂狀樣品；避免清樣本反復(fù)凍融；血清樣本2~8℃儲(chǔ)存應(yīng)不超過5天，長期保存應(yīng)置-20℃以下：如血清樣本出現(xiàn)渾濁或絮狀物，應(yīng)離心后取上清進(jìn)行檢測。

　　(4)防止試劑和樣本的相互污染；試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，避免不同批次的試劑盒混用。

　　(5)沒有用完的抗原包被板條應(yīng)與干燥劑一同放回密封袋中，于2~8℃保存。

　　(6)溫育時(shí)，反應(yīng)板不能看放，應(yīng)平鋪在37℃溫箱中，以免導(dǎo)致各反應(yīng)板受熱不均。

　　(7)TMB底物A液和B液不要暴露于強(qiáng)光，避免接觸氧化劑。

　　(8)終止液具有腐蝕作用，避免接觸眼睛和皮膚。

　　(9)嚴(yán)格按說明書操作，并控制好每一步的反應(yīng)時(shí)間和溫度。

　　(10)本試劑盒不能區(qū)分細(xì)粒棘球蚴自然感染與疫苗免疫接種產(chǎn)生的抗體：本試劑盒檢測多頭蚴感染的羊血清時(shí)，出現(xiàn)7.69%(1/13)陽性率，因此，不排除其與羊多頭蚴抗體發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性。

　　【規(guī)格】192孔/盒

　　【貯藏與有效期】2~8℃保存，有效期為9個(gè)月。

　　【批準(zhǔn)文號(hào)】獸藥生字230248948

　　【生產(chǎn)企業(yè)】重慶澳龍生物制品有限公司

　　【地址】重慶市榮昌區(qū)板橋工業(yè)園區(qū)四支路五號(hào)